柳越，毕樱馨，殷玉和，等. 发酵诺丽果汁对高尿酸血症细胞模型的保护作用及其机制研究[J]. 食品工业科技，2023，44（14）：370−376. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022080056
LIU Yue, BI Yingxin, YIN Yuhe, et al. Protective Effects and Molecular Mechanism of Fermented noni (Morinda citrifolia ) Fruit Juice on Hyperuricemia Cell Model[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(14): 370−376. (in Chinese with English abstract).doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022080056
· 营养与保健 ·
发酵诺丽果汁对高尿酸血症细胞模型的
保护作用及其机制研究
柳 越1，毕樱馨1,2，殷玉和1，陈长武2，孟祥龙3，王梦媛1,2，王铭传4，陈昕莹2，李占东2，刘咸筠2，李 皓2,
*
（1.长春工业大学化学与生命科学学院，吉林长春 130012；2.吉林工程技术师范学院生物与食品工程
学院，吉林长春 130052；3.吉林大学第一医院烧伤及皮肤创面修复外科，吉林长春 130021；4.吉林大学中日联谊医院胃肠结直肠外科，吉林长春 130033）
摘 要：目的：探究发酵诺丽果汁（fermented noni (Morinda citrifolia ) fruit juice ，FNJ ）对高尿酸血症人肾皮质近曲小管上皮细胞（Human renal proximal tubular epithelial cells ，HK-2）的保护作用并阐述其机制。方法：制备诺丽果浆，果胶酶和植物乳杆菌发酵处理后获得发酵诺丽果汁。利用腺苷联合黄嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase ，XO ）建立HK-2细胞高尿酸血症模型；通过CCK-8实验检测发酵诺丽果汁对HK-2细胞的细胞毒性；检测发酵诺丽果汁干预后HK-2细胞培养液上清中尿酸含量以及通过Western blot 法检测细胞中尿酸盐转运蛋白1（Urate anion transporter 1，URAT1）和葡萄糖转运蛋白9（glucose transporter 9，GLUT9）的表达水平，验证发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞的降尿酸作用；通过检测HK-2细胞中白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）的表达水平，确定发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞中炎症反应的作用；通过检测HK-2细胞中磷酸化核转录因子-κB （Nuclear transcription factor kappa B ，NF-κB ）p-p65/p65的表达水平，验证发酵诺丽果汁对NF-κB 信号通路的抗炎作用。结果：处理浓度低于60 μL/mL 时，发酵诺丽果汁不表现细胞毒性；发酵诺丽果汁干预后细胞培养液上清中的尿酸含量显著下降并呈剂量依赖性；发酵诺丽果汁干预组的URAT1、GLUT9表达较模型组显著降低；发酵诺丽果汁可以显著抑制高尿酸血症HK-2细胞模型中IL-1β和TNF-α的表达水平；发酵诺丽果汁可以显著抑制疾病模
型中p-p65/p65的表达。结论：发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞起到降尿酸作用，进而通过调控NF-κB 信号通路抑制了炎症反应，从而发挥保护作用。关键词：发酵诺丽果汁，高尿酸血症，HK-2细胞，NF-κB 信号通路
本文网刊:
中图分类号：TS255.44 文献标识码：A 文章编号：1002−0306（2023）14−0370−07DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2022080056
Protective Effects and Molecular Mechanism of Fermented noni (Morinda citrifolia ) Fruit Juice on Hyperuricemia Cell Model
LIU Yue 1，BI Yingxin 1,2，YIN Yuhe 1，CHEN Changwu 2，MENG Xianglong 3，WANG Mengyuan 1,2，
WANG Mingchuan 4，CHEN Xinying 2，LI Zhandong 2，LIU Xianjun 2，LI Hao 2, *
（1.School of Chemistry and Life Science, Changchun University of Technology, Changchun 130012, China ；2.College of Biological and Food Engineering, Jilin Engineering Normal University, Changchun 130052, China ；
3.Department of Burns Surgery, The First Hospital of Jilin University, Changchun 130021, China ；
4.Department of Gastrointestinal Colorectal and Anal Surgery, The China-Japan Union Hospital of Jilin University,
Changchun 130033, China ）
收稿日期：2022−08−08
基金项目：吉林省科技发展计划项目（20220202088NC ）。
作者简介：柳越（1997−），女，硕士研究生，研究方向：分子营养，E-mail ：*******************.edu 。* 通信作者：李皓（1967−），男，博士，教授，研究方向：分子营养，E-mail ：*************** 。
第 44 卷 第 14 期食品工业科技
Vol. 44 No. 14
2023 年 7 月
Science and Technology of Food Industry
Jul. 2023
Abstract：Objective: To explore the protective effect and molecular mechanisms of noni (Morinda citrifolia) fruit juice on human renal cortical epithelial cells (HK-2) with hyperuricemi. Methods: Morinda citrifolia pulp was prepared and fermented by pectinase and Lactobacillus plantarum to obtain fermented noni juice. Hyperuricemia model of HK-2 cells was established based on by adenosine combined with xanthine oxidase (XO). The cytotoxicity of fermented noni juice on HK-2 cells was detected by CCK-8 experiment. The uric acid content in the supernatant of HK-2 cell culture solution after the treatment of fermented noni juice was detected and the expression levels of hyperuricemia marker proteins urate transporter 1 (URAT1) and glucose transporter 9 (GLUT9) were detected by Western blotting to verify the regulatory effect of fermented noni juice on HK-2 cells with hyperuricemia. By detecting the expression levels of interleukin-1β (IL-1β) and Tumor necrosis factor-α (TNF-α) in HK-2 cells, the effect of fermented noni juice on inflammatory reaction in HK-2 cells with hyperuricemia was determined. By detecting the expression level of phosphorylated nuclear transcription factor kappa B (NF-κB) p-p65/p65 in HK-2 cells, the regulatory effect of fermented noni juice on NF-κB signaling pathway was verified. Results: When the treatment concentr
ation was lower than 60 μL/mL, the fermented noni juice did not show cytotoxicity. With the treatment of fermented noni juice, the uric acid content which was dose-dependent in the supernatant of cell culture solution was decreased significantly. The expressions of URAT1 and GLUT9 in the experimental group treated with fermented noni juice were significantly lower than those in model group. The fermented noni juice could significantly inhibit the expression levels of IL-1βand TNF-αin hyperuricemia model of HK-2 cell and significantly inhibited the expression of p-p65 in disease model. Conclusion: Fermented noni juice could reduce the content of uric acid in HK-2 cells with hyperuricemia, and then inhibit inflammatory reaction by regulating NF-κB signaling pathway, thus playing a protective role.
Key words：fermented Morinda citrifolia juice；hyperuricemia；HK-2 cell；NF-κB signaling pathway
尿酸是嘌呤分解代谢的最终产物，主要由次黄嘌呤和黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶XO（Xanthine oxidase，XO）的作用下产生。高尿酸血症是一种由尿酸合成增加和（或）尿酸排泄减少所引起的代谢性疾病[1]。高尿酸血症可以加速血管病变和糖耐量异常的发生和发展，与高血压、动脉粥样硬化、冠心病、脂代谢紊乱、肥胖和性功能障碍密切相关[2]。流行病学研究表明，高尿酸血症的发病率不但呈现上升趋势，而且呈现年轻化趋势。在中国，高尿酸血症的发病率为13%，男性发病率高于女性[3]。降低尿酸的疗法包括应用促进尿酸排泄的药物和抑制尿酸生成的药物，通常会产生严重的副作用。根据国际
循证指南，此类疗法仅推荐用于已有痛风和肾结石等疾病的患者[4]。因此，迫切需要开发安全有效的高尿酸血症方法。高尿酸血症的发病机制包括尿酸产量过多和排泄减少。研究表明，90%的原发性高尿酸血症病例是由肾脏尿酸盐排泄减少引起的[5]。70%的血清尿酸是从肾脏排泄出来的[6]，但90%~95%的尿酸可以重新吸收到血液中[7]。因此，调节肾小管尿酸转运体的功能，抑制尿酸重吸收是高尿酸血症的关键。尿酸盐转运蛋白1（Urate anion transporter 1，URAT1）和葡萄糖转运蛋白9（glucose transporter 9，GLUT9）是尿酸盐重吸收的两个重要转运蛋白，两者在高尿酸血症的肾小管上皮细胞中表达显著上升。URAT1和GLUT9之间的功能协作对于人肾脏中尿酸盐的重吸收是必需的，这两种转运蛋白也是目前降尿酸药物的主要靶点。高尿酸可以通过活化NF-κB信号通路调控炎症因子的表达[8]，活化的磷酸化核转录因子-κB（Nuclear transcription factor kappa B，NF-κB）p65（p-p65）可以诱导IL-1（Interleukin-1，IL-1）、TNF-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）等促炎因子的表达，通过介导炎症反应来推动肾组织的炎症损伤，进而导致肾小管间质纤维化的发生[9−10]。
诺丽是巴戟天的通称，种植于热带地区[11]。据报道，诺丽果被用来关节问题、痔疮、皮肤过敏、烧伤和疣等疾病[12]。研究者们已鉴定出诺丽植物中的多种主要成分，如钾、维生素C、萜类、生物碱、胡萝卜素、维生素A、黄酮苷、亚油酸、氨基酸、熊果酸、芦丁等[13]。诺丽果对高尿酸血症的作用及其相关机制尚不明确。
本研究旨在应用高尿酸血症HK-2细胞模型验证发酵诺丽果汁（fermented noni （Morinda citrifolia）fruit juice，FNJ）是否具有降尿酸作用，并进一步探究其对炎症反应及相关信号通路的调控，从而阐释FNJ发挥保护作用的具体机制，为其在高尿酸血症中的开发及应用提供理论依据及实验基础。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
诺丽果 购买自海南省万宁县；果胶酶（500 U/mg） 上海源叶生物科技有限公司；直投式植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）菌粉LP-115 400B 杜邦·丹尼斯克公司；HK-2细胞 北京贝纳生物公司；RPMI1640培养基、胎牛血清（FBS）、胰酶 Hyclone；双抗 Gibco；CCK-8试剂盒 碧云天公司；腺苷、XO 上海源叶公司；尿酸ELISA检测试剂盒 江苏酶标生物科技有限公司；PAGE凝胶快速制备试剂盒、BCA蛋白浓度测定试剂盒 翌圣生物科技（上海）股份有限公司公司；SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（6X）、蛋白提取用细胞裂解液、PMSF（100 mmol/L）、ECL显影剂 碧云天公司；URAT1、GLUT9、IL-1β、
第 44 卷第 14 期柳 越，等：发酵诺丽果汁对高尿酸血症细胞模型的保护作用及其机制研究· 371 ·
TNF-α以及p-p65一抗 Novus Biologicals；GAPDH 一抗、二抗 Proteintech。
发酵罐 吉林省华信葡萄酒厂自制；3-30K低温高速离心机 Sigma公司；Smart2Pure 3 UV/UF纯水仪、BB 150 CO2培养箱、Multiskan SkyHigh 酶标仪 Thermo Fisher公司；AE2000/AE倒置显微镜 Motic公司；KETA ML显影仪 威泰克公司。
1.2 实验方法
1.2.1 实验试剂配制 采摘11月中旬新鲜、成熟的诺丽果，立即在−20 ℃条件下冷冻，经冷链运输到实验室备用。生产前自然解冻，去皮，经无菌水冲洗干净、晾干，然后切成5 mm厚的果块，再经果蔬破碎机破碎。诺丽果浆升温至25 ℃以上，按0.225 g/L 边搅拌边加入果胶酶，然后接入植物乳杆菌（每100 mL 果汁接种0.01 g菌粉，初始活菌数为107 CFU/mL），4 h后用20目滤布过滤，并放到40 ℃恒温箱中发酵25 d，过滤后恒温38 ℃发酵30 d。而后虹吸上清液，过滤，然后在80~82 ℃ 20 min条件下进行杀菌，无菌灌装获得FNJ。
在超净工作台内FNJ经一次性0.22 μm滤膜进行除菌过滤，配制不同浓度的FNJ的不完全培养基：20 μL/mL（1 mL FNJ、0.5 mL双抗、48.5 mL RPMI 1640培养基）、40 μL/mL（2 mL FNJ、0.5 mL双抗、47.5 mL RPMI1640培养基）、60 μL/mL（3 mL FNJ、0.5 mL双抗、46.5 mL RPMI1640培养基）、80 μL/mL （4 mL FNJ、0.5 mL双抗、45.5 mL RPMI1640培养基）、100 μL/mL（5 mL FNJ、0.5 mL双抗、44.5 mL RPMI1640培养基）。在超净工作台内量取0.5 mL 双抗、44.5 mL RPMI1640培
养基、5 mL FBS，混匀制备成完全培养液备用；在超净工作台内量取0.5 mL 双抗、49.5 mL RPMI1640培养基，混匀制备成不完全培养液备用；称量细胞诱导剂腺苷和XO，溶解后混匀，在超净工作台内用0.22 μm膜滤器过滤除菌备用，腺苷溶液的终浓度为2.5 mmol/L，XO溶液的终浓度为0.005 U/mL。
1.2.2 细胞培养 HK-2细胞为贴壁生长，使用含10% FBS和1%双抗的RPMI1640培养基在37 ℃、5%浓度的二氧化碳培养箱中进行培养，当细胞生长状态良好、融合度达80%~90%时，用0.25％胰酶消化细胞，按照后续实验需要的细胞数量进行传代。1.2.3 高尿酸血症细胞模型的建立 参照Chuanli 等[14]的建模方法，将HK-2细胞在完全培养基中培养至亚融合状态，设置空白组（无腺苷无XO）、XO 组（无腺苷有XO）、腺苷+XO组（有腺苷有XO），以1×105个/mL（总体积1.0 mL/孔）密度接种于24孔板中，37 ℃孵育48 h后，吸出培养液，用PBS洗涤3次，然后换成无血清的RPMI1640不完全培养液进行进一步培养。空白组：HK-2细胞在不完全培养液中继续培养38 h，然后严格按照尿酸试剂盒内说明书操作，对细胞培养液上清中的尿酸含量进行检测；对照组：HK-2细胞在不完全培养液中继续培养30 h，然后加入XO（0.005 U/mL）继续孵育8 h，严格按照尿酸试剂盒内说明书操作，对细胞培养液上清中的尿酸含量进行检测；模型组：HK-2细胞在加入腺苷（2.5 mmoL/L）诱导的不完全培养液中继续培养30 h，然后加入XO（0.005 U/mL），继续培养8 h，严格按照尿酸试剂盒内说明书操作，对细胞培养液上清中的尿酸含量进行检测，判断模型是否构建成功。
1.2.4 CCK-8细胞毒性试验 取对数生长期的HK-2细胞，使细胞处于悬浮状态，吹打均匀后将细胞数量稀释调整为105个细胞/孔，设置空白、对照组（无FNJ处理仅有细胞）及FNJ组，分别将PBS、完全培养液（总体积100 μL）、细胞悬液均匀加入到96孔板，将培养板放在培养箱预培养24 h。24 h后吸出细胞培养液，PBS冲洗３次，加入不完全培养基，将培养板放在培养箱培养24 h。24 h后倒出不完全培养基，FNJ组加入含有浓度分别为20、40、60、80、100 μL/mL的FNJ的不完全培养基。每组设置３个复孔。FNJ干预孵育24 h后去除含有FNJ的培养基，PBS冲洗3次，每孔加入10 μL CCK-8检测液。将培养板在培养箱内孵育4 h。用酶标仪测定在450 nm处的吸光度，计算细胞存活率。
细胞存活率（%）=[A（加药）−A（空白）]／[A（0加药）−A（空白）]×100
式中：A（FNJ）表示具有细胞、CCK-8溶液和FNJ的孔的吸光度；A（空白）表示具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度；A（对照）表示具有细胞、CCK-8溶液而没有FNJ的孔的吸光度。
1.2.5 尿酸检测 将HK-2细胞在完全培养基中培养至亚融合状态，以1×105个/mL（总体积1.0 mL/孔）密度接种于24孔板中，37 ℃孵育48 h后，吸出培养液，用PBS洗涤3次，然后空白对照组和模型组换成无血清的不完全培养基，FNJ组加入含有20、40、60 μL/mL不同浓度FNJ的不完全培养基，进行后续培养。24 h后，PBS洗涤三次，空白对照组：HK-2细胞在不完全培养基中继续培养38 h，严格按照尿酸试剂盒内说明书操作，对细胞培养液上清中的尿酸含量进行检测；模型组：HK-2细胞在加入
腺苷（2.5 mmoL/L）诱导的不完全培养液中继续培养30 h，然后加入XO（0.005 U/mL），继续培养8 h，严格按照尿酸试剂盒内说明书操作，对细胞培养液上清中的尿酸含量进行检测；FNJ组：HK-2细胞在加入腺苷（2.5 mmoL/L）诱导的不完全培养液中继续培养30 h，然后加入XO（0.005 U/mL），继续培养8 h，严格按照尿酸试剂盒内说明书操作，对细胞培养液上清中的尿酸含量进行检测。
1.2.6 Western blot检测 收集用于蛋白表达检测的细胞，加入相应体积的细胞裂解液，煮沸裂解细胞后，用BCA试剂盒检测蛋白浓度。取适量蛋白进行SDS-PAGE电泳，待上样缓冲液中的溴酚蓝指示剂
· 372 ·食品工业科技2023年 7 月
移动至凝胶底部时终止电泳。通过湿转法将凝胶上的蛋白转移至PVDF 膜上，用5% BSA 封闭液室温下处理1 h ，分别用URAT1、GLUT9、IL-1β、TNF-α以及p-p65一抗和内参抗体对相应蛋白进行孵育，室温处理1 h ，洗膜后进行二抗孵育，最后通过ECL 法曝光显影，利用ImageJ 软件进行灰度值计算。
1.3 数据处理
用统计学数据处理软件SPSS23.0对实验数据
进行处理分析，作图运用GraphPad Prism 9.0软件。采用单因素方差分析法（One way ANOVA ）分
析组间差异性，P <0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果与分析
2.1 验证HK-2细胞高尿酸血症模型的建立
加入XO 和腺苷处理细胞后，用尿酸试剂盒测
定细胞培养液上清中尿酸含量。如图1所示与空白组相比，XO 加腺苷处理组细胞培养液上清尿酸含量极显著提高，具有统计学意义（P <0.01）。而单独加入XO ，细胞培养液上清尿酸含量并没有显著变化。为了进一步验证模型构建是否成功，本研究检测了
URAT1和GLUT9的表达水平变化（图2）。与空白对照组相比，XO 加腺苷处理的模型组中URAT1和GLUT9表达水平显著升高。综合上述结果，提示HK-2细胞高尿酸血症模型构建成功。
2.2 FNJ 对HK-2细胞的CCK-8细胞毒性试验
FNJ 对HK-2细胞的细胞存活率影响结果如
图3所示，与对照组比较，加入低浓度FNJ 时（低于60 μL/mL ），对细胞存活率没有显著影响；当加
入FNJ 浓度高于80 μL/mL 时，细胞存活率受到显著抑制。因此后续实验本研究选用FNJ 干预浓度为20、40、60 μL/mL 。
150
100
细胞存活率 (%)
50
204060
FNJ 浓度 (μL/mL)
80#
#
100
图 3 FNJ 对HK-2细胞的细胞毒性Fig.3 Cytotoxicity of FNJ to HK-2 cells
2.3 FNJ 对高尿酸血症HK-2细胞的作用
如图4所示，模型组细胞培养液上清中尿酸含
量明显高于空白组（P <0.01），说明造模成功；为了进一步确定FNJ 的降尿酸作用，本研究检测了URAT1和GLUT9的表达水平变化（图5），与空白组相比，
模型组URAT1和GLUT9蛋白显著升高；和模型组比较，40 μL/mL FNJ 组和60 μL/mL FNJ 组细胞培养液上清中尿酸含量及URAT1和GLUT9蛋白显著降低（P <0.01）；且与20 μL/mL FNJ 组比较，40 μL/mL FNJ 组和60 μL/mL FNJ 组细胞培养液上
6040
20
细胞培养液上清中尿酸含量
(μm o l /L )
0腺苷XO
#
−
−−+
+
+图 1 细胞培养液上清中尿酸的含量Fig.1 Uric acid content in cell culture supernatant
注：与空白组比较，#
P <0.01；图2~图3。
URAT1XO A
B 56#
#
42G L U T 9/G A P D H
432U R A T 1/G A P D H
10
−
−−+−−+−
+
+
+
+
腺苷XO
腺苷−−+−
+
+
XO
腺苷
GLUT9GAPDH
图 2 细胞内URAT1和GLUT9的表达Fig.2 Expression of URAT1 and GLUT9 in cells
6040
#
#
#,a,b
a,b,c
20
细胞培养液上清中尿酸含量(μm o l /L )
空
白
组
模
型
组
20
μ
L /m
L F
尿酸高痛风美食食谱N
J 组
40
μ
L /m
L F N J 组60 μL /m
L F
N
J 组
图 4 FNJ 对高尿酸血症HK-2细胞的降尿酸作用Fig.4 Hypouricemic effect of FNJ on hyperuricemia HK-2
cells 注：与空白组比较，#P <0.01；与模型组比较，a P <0.01；与20 μL/mL FNJ 组比较，b P <0.01；与40 μL/mL FNJ 组比较，c
P <0.01；图5同。
第 44 卷 第 14 期柳 越 ，等： 发酵诺丽果汁对高尿酸血症细胞模型的保护作用及其机制研究· 373 ·
清中尿酸含量及URAT1和GLUT9蛋白显著降低（P <0.01）；与40 μL/mL FNJ 组比较，60 μL/mL FNJ 组细胞培养液上清中尿酸含量及URAT1和GLUT9蛋白极显著降低（P <0.01），表明FNJ 可降低高尿酸血症HK-2细胞培养液上清中尿酸含量，并呈剂量依赖性。
2.4 FNJ 抑制高尿酸血症HK-2细胞的炎症反应
研究表明高尿酸血症导致的细胞损伤与其诱导
的炎症反应发生相关会引起炎症反应，为了阐明FNJ 在对高尿酸血症HK-2细胞中炎症反应的作用，本研究对相关的炎症因子进行了检测。如图6所示，与空白组相比，模型组TNF-α、IL-1β水平显著升高。与模型组相比，加入FNJ 后TNF-α、IL-1β水平显著降低。以上结果说明FNJ 可以抑制高尿酸血症HK-2细胞的炎症反应。
TNF-αA B 642#
#,a
U R A T 1/G A P D H
空白
组
模型
组
F N
J 组
空
白组
模
型组
F N J 组
15105#
#,a
G L U T 9/G A P D H
空
白组
模
型组
F N J 组
IL-1β
GAPDH
图 6 FNJ 对高尿酸血症HK-2细胞中TNF-α和IL-1β表达
的抑制作用
Fig.6 FNJ inhibits the expression of TNF-α and IL-1β in
hyperuricemic HK-2 cells
注：与空白组比较，#P <0.01；与模型组比较，a P <0.01。
2.5 FNJ 通过抑制NF-κB 信号通路调控炎症反应
为了进一步探究FNJ 抑制高尿酸血症HK-2细
胞中炎症反应的相关机制，本研究对其与NF-κB 信号通路之间的调控关系进行了检测。通过检测p-
p65/p65的表达变化，如图7所示，FNJ 处理24 h 后，与模型组细胞相比p-p65/p65的表达水平显著降低，提示FNJ 可以抑制炎症反应相关的NF-κB 信号通路。
p-p65A
B #
#,a
201510p -p 65/G A P D H
50
空
白
组
模
型
组
F N
J 组
空
白组
模
型组
F N J 组
#
#,a
201510p -p 65/p -65
50
空白
组
模型
组F N J 组
p65GAPDH
图 7 FNJ 对高尿酸血症HK-2细胞中p-p65表达的
抑制作用
Fig.7 FNJ inhibits the expression of p-p65 in hyperuricemia
HK-2 cells 注：与空白组比较，#
P <0.01；与模型组比较，a P <0.01。
3 讨论与结论
本研究参考Chuanli 等的方法利用腺苷联合
XO 建立HK-2细胞高尿酸血症模型；通过CCK-8实验确定FNJ 对HK-2细胞毒性；检测FNJ 干预后HK-2细胞培养液上清中尿酸含量的变化以及细胞中尿酸转运蛋白URAT1、GLUT9的表达水平，确定FNJ 对高尿酸血症HK-2细胞的改善作用；为了阐明FNJ 对高尿酸血症HK-2细胞中炎症反应的作用，本研究对细胞中TNF-α、IL-1β中进行检测，发现FNJ 可以抑制高尿酸血症HK-2细胞中的炎症反应；通过对NF-κB 信号通路的检测，本研究进一步揭示了FNJ 抑制炎症反应的信号通路机制。
FNJ 被报道具有多种健康益处，如减轻疼痛、抑制感染、用于多种慢性疾病[15−16]。FNJ 对痛风
空白
组模型组20 μL /m L F N J 组40 μL /m L F N J 组60 μL /m L F N J 组
A
B 54##
#,a,b
3U R A T 1/G A P D H
210
URAT1GLUT9GAPDH
空
白组模型组20
μL /m L F N J 组40 μL /m L F N J 组60 μL /m L F N J 组
C 6
#
##,a,b
a,b,c
4G L U T 9/G A P D H
20
空
白组模型组20
μL /m L F N J 组40 μL /m L F N J 组60 μL /m L F N J 组图 5 FNJ 对高尿酸血症HK-2细胞中URAT1和GLUT9表达的抑制作用
Fig.5 Inhibitory effect of FNJ on the expression of URAT1 and GLUT9 in hyperuricemic HK-2 cells
· 374 ·
食品工业科技2023年 7 月
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